应用基因表达谱芯片研究内毒素诱导的人树突细胞成熟前后免疫相关基因的差异表达

摘要

目的 研究人外周血来源的树突细胞(DCs)经内毒素诱导成熟过程中基因表达谱的改变.方法 采用GM-CSF及IL-4诱导人外周血单核细胞获得非成熟DCs,以100ng/ml内毒素(LPS)作用48h获得成熟DCs,收集细胞提取总RNA,应用SuperArray 低通量全长基因cDNA芯片筛选DCs成熟前后差异表达的基因.结果 经LPS诱导后DCs高表达成熟DCs表面标志物.经LPS处理48h后诱导成熟的DCs与未经处理的非成熟DCs相比,共有50条基因出现差异表达,占芯片基因总数的30,3%.其中35条基因表达增加,15条基因表达下降.细胞因子/受体和趋化因子/受体基因中有12条表达上调,2条表达下调,抗原获取及提呈相关分子中有10条表达上调,5条表达下调,膜受体及信号转导分子中13条表达上调,8条表达下调.RT-PCR进一步证实了基因表达谱芯片的结果.结论 LPS对DCs成熟过程中的基因表达具有显著影响,其范围涉及细胞因子、趋化因子及受体,抗原提呈相关分子及细胞内信号转导分子等.分析这些差异基因的表达,对进一步全面了解DCs成熟过程有重要意义.