钾离子通道阻断剂及开放剂对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

摘要

目的检验钾离子通道开放剂及阻断剂对培养大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法采用组织块法原代培养大鼠腹主动脉血管平滑肌细胞。原代培养的第5代细胞消化后培养于多个25T培养瓶中。在培养瓶中加入不同的试剂：A．对照组；B．Pinacidil 0．2mM；C．优降糖0．05mM；D．Pinacidil 0．2mM＋优降糖0．05mM。显微镜下观察并拍照。药物作用24h后消化细胞，以AnnexinV和PI双染色。上流式细胞仪检测。结果使用KAT，通道开放剂Pinacidil 0．2mM后12h，显微镜下观察见细胞形态皱缩，呈球形，体积缩小。流式细胞仪检测见晚期凋亡细胞比例增加，而优降糖0．05mM可逆转Pinacidil0．2mM的这种作用，优降糖0．05mM本身并不增加或减少凋亡细胞的比例。结论血管平滑肌细胞膜上的钾离子通道KAT，参与了血管平滑肌细胞凋亡。