海洋链霉菌分离株M095遗传转化体系的建立

摘要

研究了海洋链霉菌分离株M095的基因转移系统.利用属间接合转移将具有oriT的大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pIJ8600转入Escherichia coli ET12567(pUZ8002)中,获得供体菌.将供体菌与预萌发的菌株M095的孢子进行接合转移,将质粒pIJ8600转入菌株M095中,其转化率为1.99×10-4个接合转化子/受体.Southern 杂交证明质粒pIJ8600 已经整合到菌株M095 的染色体上.同时,将来自Spirulina maxima (Cyanophyta)的别藻蓝蛋白基因(apc)克隆在质粒pIJ8600的XbaⅠ和BglⅡ位点,产生质粒pAPIJ.用接合转移法将质粒pAPIJ转入菌株M095.通过 SDS-PAGE 分析, 得到2个大小为22 ku和17 ku的蛋白,分别相对应于别藻蓝蛋白的α和β亚基.这些结果进一步证明菌株M095的遗传转化体系已经成功建立起来,这将为其他海洋放线菌遗传转化工作的研究奠定基础.