miR-448通过抑制上皮间质转化抑制肺癌细胞增殖和运动能力

摘要

探讨miR-448对肺癌细胞增殖和运动的影响及其分子机制.采用实时荧光定量PCR (polymerase chainreaction)检测原发肺癌组织和癌旁正常组织miR-448表达水平.转染miR-448 mimic和inhibitor至肺癌A549细胞系,通过MTT (3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide)、平板克隆形成和Tran-swell实验观察miR-448表达对A549增殖和运动能力的影响;利用Western blot检测EMT (epithelial-mes-enchymal transition)标志物蛋白表达水平,通过实时荧光定量PCR检测EMT相关转录因子mRNA表达水平.实时荧光定量PCR显示较癌旁正常组织相比,miR-448在原发肺癌组织中表达降低.MTT和平板克隆形成实验显示,过表达miR-448抑制A549细胞增殖和运动能力;降表达miR--448增强A549细胞增殖和运动能力.West-em blot显示降表达miR-448能下调上皮标志物E-cadherin,上调间质标志物Vimentin表达水平.实时荧光定量PCR显示降表达miR-448能上调EMT相关转录因子Twist1和ZEB1 mRNA表达水平.miR-448可通过抑制EMT抑制肺癌进展.