RNA干扰Dnmt1和Dnmt3b对小鼠胚胎成纤维细胞凋亡和基因组DNA甲基化水平的影响

摘要

DNA甲基转移酶1(DNMT1)负责DNA甲基化维持,DNA甲基转移酶3b (DNMT3b)主要负责DNA从头甲基化,在体细胞中同时干扰Dnmt1、Dnmt3b表达会给细胞带来何种影响还未见报道.实验以小鼠胚胎成纤维细胞为实验对象,用RNA干扰方法对Dnmt1和Dnmt3b进行敲低,研究分别干扰和同时干扰这两个基因对小鼠胚胎成纤维细胞凋亡、基因组甲基化水平的影响.研究发现,siRNA转染后24h,Dnmt3b干扰组和Dnmt+Dnmt3b同时干扰组细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)Mrna水平显著降低(P＜0.05);转染后48 h,Dnmt3b单独干扰组、Dnmt1+ Dnmt3b同时干扰组中细胞凋亡显著增加(P＜0.05);Dnmt3b单独干扰组细胞基因组甲基化水平下降32％ (P＜0.01),Dnmt +Dnmt3b同时干扰组细胞的基因组甲基化水平下降约44％ (P＜0.01).结果表明,DNMT3b在小鼠胚胎成纤维细胞正常增殖、基因组甲基化水平的维持上具有重要作用.