EB病毒早期蛋白P54的原核表达及其免疫原性的研究

摘要

PCR法获得编码EB病毒早期蛋白P54的基因BMRF1,序列分析后亚克隆入原核表达载体pET30a.表达质粒pET30a-BMRF1在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导后表达了P54抗原,SDS-PAGE表明其相对分子质量为51 000;采用镍离子亲和柱纯化重组蛋白.Western印迹结果表明纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后产生了P54特异性抗体.间接免疫荧光表明免疫血清可以识别激活的Raji细胞中表达的P54蛋白.以上结果表明构建了原核表达质粒pET30a-BMRF1并在大肠杆菌细胞中成功表达EB病毒早期蛋白P54,表达蛋白具有很好的抗原性和免疫原性.