双抗体夹心ELISA检测HIV-1 gp41抗原方法的建立

摘要

目的:建立检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA,并探讨其临床应用的可行性.方法:用饱和硫酸铵(SAS)纯化抗HIV-1 gp41-5单克隆抗体(mAb),用HRP标记后建立双抗体夹心ELISA法,对其灵敏度及特异性进行检测,并用该方法对40份HIV-1阳性血清进行了检测.结果:用mAb E12(5μg/mL)为包被抗体,2H6为酶标记抗体(1:900)建立了双抗体夹心ELISA法,检测gp41-5多肽的灵敏度是100 pg/mL.对HIV-1阳性血清中gp41抗原的检出率为67.5%(27/40).结论:建立了特异性强、灵敏度良好的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法.