哺乳动物细胞高效表达载体的优化

摘要

目的:优化哺乳动物细胞表达系统,提高目的基因的表达效率.方法:以组织型纤溶酶原激活剂(tPA)为报告基因,利用本实验室建立的CHOfrt/dhfr-细胞定点整合表达系统,对多种表达调控元件(包括hCMV和hEF-1α启动子、hCMV增强子、hEF-1α1st内含子及翻译增强子H213和V163等)及其多种组合的表达效率进行了系统的比较和评价.结果:hCMV启动子与H213组合以及hEF-1α启动子与V163组合的表达效率分别是仅含hCMV启动子的156.6%和139.5%.结论:该研究为构建高效的哺乳动物细胞表达载体奠定了基础.