中国仓鼠卵巢细胞的悬浮适应及代谢特征

摘要

目的:通过悬浮适应,使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)获得悬浮生长的特性,并可在悬浮培养条件下较快地生长.方法:将CHO细胞以3x105/mL接种于100 mL的三角瓶内,培养时加入1%/J,牛血清、1 g/L Plumnic F-68、25 ug/mL硫酸葡聚糖,培养体积35 mL,摇床转速90 r/min,每24 h离心换液,当细胞增殖为2x106/mL时传代.结果:经过悬浮适应,细胞的平均比生长速率由适应最初的0.27/d提高为适应后的0.48/d,最大总细胞密度由适应初期的2.5x106/mL提高为适应后的6.3x106/mL,目的蛋自活性也由适应前的2 781 U/mL提高为适应后的8 878 U/mL,适应后细胞的葡萄糖平均比消耗宰为1.42 umoL/(106细胞·d),低于适应前的2.16umol/(106细胞·d).结论:贴壁生长的CHO细胞经过悬浮适应,不仅可以在悬浮培养条件下快速生长,而且细胞对葡萄糖的利用率也得到提高.