荧光定量聚合酶链反应检测胃癌let-7 MicroRNA

摘要

目的 建立一种快速、准确、特异、定量检测let-7 miRNA的方法并探讨其在胃癌发生发展中的意义.方法 提取20例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织总RNA,采用颈环逆转录引物进行逆转录;以let-7a micro RNA为靶基因,设计合成引物和荧光(MGB)探针;建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测let-7 miRNA,并检测其在胃癌组织中的表达.结果 该方法检测let-7a miRNA的灵敏度为1.0×101拷贝;检测总RNA的下限为0.05ng.20例临床标本中,7例(35%,7/20)胃癌组织中let-7a miRNA表达明显低于其远癌端正常胃黏膜对照组织.结论 应用颈环逆转录引物及MGB探针技术荧光定量PCR方法能够准确、快速、特异、敏感地检测胃癌let-7miRNA,且其表达下调可能与胃癌的发生发展有密切关系.