实时荧光定量聚合酶链反应快速检测下呼吸道标本耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床研究

摘要

目的：运用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）快速检测法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）核酸，从而建立下呼吸道标本MRSA的快速检测方法。
　　方法：(1)检测方法建立及菌株研究：收集临床分离的75株金黄色葡萄球菌菌株，运用实时荧光定量PCR快速检测法检测标本Nuc及MecA基因，并以分离培养+头孢西丁纸片扩散法为标准，判断实时荧光定量PCR快速检测法与常规方法的一致性。（2）下呼吸道标本研究：收集110份下呼吸道标本(合格痰液标本70份，经气道吸引下呼吸道分泌物40份)，经过标本预处理后，运用实时荧光定量PCR快速检测法检测，以分离培养+头孢西丁纸片扩散法为标准，判断实时荧光定量PCR快速检测法对下呼吸道标本检测的敏感性、特异性。
　　结果：(1)以分离培养+头孢西丁纸片扩散法为标准，实时荧光定量PCR检测法检测金黄色葡萄球菌菌株中MRSA的敏感度、特异度均为100％。（2）实时荧光定量PCR快速检测法检测下呼吸道标本中MRSA的敏感度为100%、特异度为87.06%，阳性预测值为69.45%，阴性预测值为100%，Kappa值为0.75(P<0.05)。
　　结论：（1）运用针对nuc及mecA基因进行的实时荧光定量PCR快速检测法，在菌株检测方面，具有与常规方法完全一致的检测结果。（2）实时荧光定量PCR快速检测法检测下呼吸道标本中MRSA的敏感度高、特异性强，与分离培养+头孢西丁纸片扩散法检测结果具有很好的一致性，具有较高的临床应用价值。

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前言

第一部分 实时荧光定量PCR快速检测方法学建立及菌株检测验证

引言

材料和方法

结果

讨论

结论

第二部分 实时荧光定量聚合酶链反应快速检测下呼吸道标本耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究

引言

对象和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附录 论著

附录 综述

致谢

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