小鼠肝炎病毒(MHV-1)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和鉴定

摘要

用小鼠肝炎病毒（MHV-1）接种DBT细胞,收获病毒经反复冻融、超声波处理、逐级差速离心提纯和浓缩。用该病毒提取液经腹腔免疫SPF级BALB/c系小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,通过间接ELISA试验,筛选出5株分泌MHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株(C10H8、A11C10、F2G2、F3D11、F7B9)。5株单抗与流行性出血热病毒（EHFV）、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）、痘苗病毒、仙台病毒、小鼠肝炎病毒(MHV-2、-3、-JHM、-A59)均无反应。抗MHV-1的阳性血清能阻断5株单抗与MHV-1的反应。5株单抗均无沉淀特性和中和特性。液氮保存6个月后复苏,仍可分泌特异性抗体。用MHV-1单抗鉴定上海分离到的1株小鼠肝炎病毒(MHV-Hu79),证实MHV-Hu79株不是MHV-1。