低浓度NaOH对小鼠精子DNA完整性的影响

摘要

目的 用精子DNA完整性评价NaOH溶液对小鼠精子进行头尾分离的最优条件.方法 取2～3月龄雄鼠附睾尾精子,稀释到合适浓度(5×106～10×106/ml),0～37℃下,加入不同浓度NaOH溶液孵育,显微镜下观察精子的头尾分离率,流式细胞仪检测精子的质膜完整性及DNA完整性.结果 NaOH对精子头尾分离的效果,与碱浓度、作用时间和作用温度呈正相关,作用温度越高,时间越长,头尾分离效果越好,但同时对精子DNA的损伤程度也就越大.本研究证实精子在10 mmol/t,NaOH溶液,0℃下孵育2 h,精子头尾分离的效率可达55%,而精子DNA损伤与空白对照相比,则无显著性差异.结论 在本研究条件下低浓度NaOH处理小鼠精子,方法简单易行,可有效去除小鼠尾巴,而又不使其DNA受损.