巴戟天含药血清对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及JNK信号通路的影响

摘要

目的观察巴戟天含药血清对人骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响,并探讨其潜在机制。方法取4周龄SD大鼠12只,随机分4组,分别给予低、中、高三种浓度巴戟天溶液(0. 54、1. 08、2. 16 g/kg)及蒸馏水灌胃,分离血清。体外培养人骨肉瘤MG63细胞,采用不同浓度的巴戟天含药血清干预,以空白血清为对照。采用MTT法检测巴戟天含药血清干预MG63细胞24、48 h的增殖率,流式细胞术检测凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡形态,Western-blotting法检测JNK信号通路相关蛋白JNK、p-JNK、Bad、p-Bad、Cleaved caspase-3的表达情况。结果中、高浓度的巴戟天含药血清能有效抑制MG63细胞增殖(P <0. 01或P <0. 05),但干预48 h对比24 h并无显著差异;同时,高浓度组MG63细胞较对照组凋亡率显著增加(P <0. 01),细胞分布散乱,胞核固缩,细胞透亮,呈现典型的凋亡形态学特征;高浓度的巴戟天含药血清能显著增加MG63细胞JNK总蛋白及磷酸化p-JNK蛋白的表达(P <0. 01或P <0. 05),上调p-Bad和Cleaved caspase-3蛋白表达(P <0. 01),但对Bad总蛋白表达无明显影响。结论巴戟天含药血清能促进人骨肉瘤MG63细胞凋亡,其作用机制与激活JNK信号通路有关。