PTH(1-34)对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白及Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

摘要

目的：观察PTH（1-34）对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白（MGP）、及Wnt/β-catenin信号通路表达的影响，探讨PTH（1-34）在防治骨质疏松症中可能的新分子机制。
　　方法：（1）不同浓度PTH（1-34）（10-M9、10-8 M、10-7M）干预MG63,寻找最有效的剂量；（2）10-7M PTH（1-34）、200ng/ml DKK-1、10-7M PTH（1-34）+200ng/ml DKK-1干预MG63后；提取总MGP的mRNA及总蛋白，用Western-blot及荧光实时定量RT-PCR检测相关因子蛋白及基因水平的表达情况；（3）碱性磷酸酶（ALP）染色及活力测定检测PTH及Dkk-1干预后细胞分化情况。
　　结果：1、PTH（1-34）上调MGP基因的表达，MGP mRNA的表达分别是对照组的2.56倍、4.14倍、7.81倍（*P<0.05，**P<0.01），且呈剂量依赖性增高；2、PTH增强MG63细胞ALP活力， Dkk-1抑制ALP活性，Dkk-1与PTH联用阻断PTH上调ALP活力（P<0.05）；3、PTH上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子LRP5、β-catenin、Runx2 mRNA及蛋白水平,其中mRNA分别是对照组的2.65、4.01、3.48倍(*P<0.05，**P<0.01)；DKK-1对PTH（1-34）促MGP表达没有影响，但大部分阻断了Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达。
　　结论：PTH（1-34）能明显上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达，Wnt/β-catenin信号通路和MGP在PTH调节骨代谢中起重要作用。