miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响

摘要

目的:探讨miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响.方法:采用qRT-PCR法检测miR-190b在肾母细胞瘤和相应的癌旁正常组织(n=20)中的表达,免疫组化法检测组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白的表达.TargetScan预测miR-190b与PTEN是否具有靶向关系,并采用双荧光素酶报告实验进行验证.SK-NEP-1细胞分为4组:空白对照组,不进行任何处理;miR-对照(NC)组,转染miR-NC质粒;miR-190b模拟物组,转染miR-190b模拟物质粒;miR-190b抑制剂组,转染miR-190b抑制剂质粒;48 h后,qRT-PCR法检测细胞中miR-190b的表达;细胞集落形成实验检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测各组细胞的侵袭、迁移能力;Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞中PTEN、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达.结果:与癌旁正常组织相比,肾母细胞瘤组织中miR-190b表达上调,PTEN阳性细胞百分比下降,PI3K和p-AKT阳性细胞百分比上升(P<0.05).miR-190b可靶向负调节PTEN的表达.与空白对照组和miR-NC组相比,miR-190b模拟物组中miR-190b表达水平上升,细胞增殖、迁移和侵袭能力提高,凋亡率下降(P<0.05);miR-190b抑制剂组中miR-190b的表达水平下降,增殖能力、迁移和侵袭能力下降,凋亡率上升(P<0.05).与空白对照组和miR-NC组相比,miR-190b模拟物组中PTEN蛋白表达下调,而PI3K和p-AKT/AKT上调(P<0.05);miR-190b抑制剂组PTEN蛋白表达上调,PI3K和p-AKT/AKT下调(P<0.05).结论:miR-190b通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路影响肾母细胞瘤细胞的增殖、迁移和凋亡.