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LncRNA CASC2与miR-155-5 p的靶向关系及对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响

     

摘要

目的:探讨LncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:qRT-PCR法检测人正常子宫内膜上皮细胞hEEC,人子宫内膜癌细胞HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2、miR-155-5p的表达。利用双荧光素酶报告实验验证CASC2和miR-155-5p的靶向关系。将HEC-1A细胞分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2,anti-miR-NC、anti-miR-155-5p,pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2+miR-NC、pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p。48 h后Western blot法测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:与hEEC细胞相比,HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,CASC2和miR-155-5p存在靶向关系。与未转染组和pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CASC2组迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与未转染组和anti-miR-NC组相比,anti-miR-155-5p组细胞中miR-155-5p表达降低,迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与pcDNA3.1-CASC2和pcDNA3.1-CASC2+miR-NC组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组细胞中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高,迁移细胞数和侵袭细胞数均升高,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平亦升高(P<0.05)。结论:CASC2可靶向负调节miR-155-5p,抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭。

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