TLR4对肺炎链球菌诱导的A549细胞凋亡的影响

摘要

目的:研究Toll样受体4(TLR4)对肺炎链球菌诱导的A549细胞凋亡的影响.方法:用肺炎链球菌诱导A549细胞后感染TLR4 siRNA慢病毒,检测TLR4 siRNA对细胞中TLR4表达的沉默效果,流式细胞术检测A549细胞凋亡的变化,Western blot检测A549细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达的变化,同时检测胞浆和线粒体中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白表达的变化.以仅用肺炎链球菌诱导的A549细胞为对照.结果:TLR4 siRNA慢病毒可以下调肺炎链球菌诱导的A549细胞中TLR4 mRNA和蛋白的表达水平.肺炎链球菌诱导处理后的A549细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,胞浆中Cytochrome C蛋白水平升高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平降低.与单纯用肺炎链球菌诱导的A549细胞比较,沉默TLR4后的A549细胞凋亡率降低,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,胞浆中Cytochrome C蛋白水平降低,线粒体中Cytochrome C蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:降低TLR4的表达可以抑制肺炎链球菌诱导的A549细胞凋亡,作用机制可能与线粒体凋亡途径有关.