新生大鼠脑缺氧缺血后凋亡诱导因子核转移与DNA损伤检测

摘要

目的: 探讨新生大鼠脑缺氧缺血后神经元凋亡诱导因子(AIF)的跨膜核转移与DNA损伤之间的关系.方法:7 d龄Wistar大鼠结扎左侧颈总动脉后给予吸入含有体积分数为7.7%氧气的氮氧混合气55 min,制成脑缺氧缺血(HI)模型,在HI后不同的时间点处死取脑进行AIF的免疫组化染色及与微管相关蛋白-2(MAP-2)、末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)和发夹寡核苷酸探针(HPP)免疫荧光双染色. 结果: HI后即刻就有AIF从线粒体中释放并转移到细胞核,表现为核染色质浓缩染色阳性;损伤侧大脑皮层AIF阳性细胞核数在HI后8 h达到峰值,随后开始下降;AIF阳性细胞主要分布在MAP-2 阴性区域,并且与其他反映DNA双链断裂的细胞标志TUNEL 和HPP有高度重合.结论: AIF核转移是新生大鼠脑缺氧缺血后神经细胞损伤的早期指标,提示AIF在未成熟脑神经细胞损伤中起重要作用.