先天性长QT综合征2型hERG基因G604S突变真核表达载体的构建和表达

摘要

目的:构建长QT综合征(LQTS)2型h ERG基因G604S突变的真核表达载体G604S-h ERG-pc DNA3、G604S-h ERG-p EGFP。方法:采用重叠延伸PCR法在p EGM-h ERG基础上构建G604S突变体PGEM-h ERG-G604S,通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pc DNA3和p EGFP-C2中并测序验证,用脂质体转染法将G604S-h ERG-p EGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果:构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证h ERG基因1 810位点碱基G突变为A,构建的G604S-h ERG-p EGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论:成功构建h ERG基因G604S-h ERG-pc DNA3和G604S-h ERG-p EGFP表达载体。