宫颈癌HeLa细胞株高纯度同步化模型的建立与分析

摘要

利用药物抑制法,采用胸苷、含羞草素、秋水仙碱和羟基脲阻断或两种试剂共同阻断HeLa细胞,去除药物后正常培养细胞,根据流式细胞术确认细胞在不同时间点的细胞周期情况,建立宫颈癌HeLa细胞株G1、S和G2/M期高纯度的同步化模型.药物阻断实验结果表明:胸苷和羟基脲顺序阻断后释放可获得90.0％以上S期细胞;胸苷和秋水仙碱顺序阻断后释放可获得96.0％的G1期和99.0％的G2/M细胞;胸苷单阻断也可获得持续8h高于85.0％的G1同步率.此外,细胞种植密度从105个/mL提高到107个/mL,G1期百分比也由50.0％提高至75.0％.宫颈癌HeLa细胞株高同步率模型可以通过以下方式建立:高S期细胞可通过胸苷和羟基脲顺序阻断实现;G2/M细胞可通过胸苷和秋水仙碱顺序阻断后释放获得;高G1期细胞可通过胸苷和秋水仙碱顺序阻断或胸苷单阻断实现,接触抑制对提高G1期的比率影响要大于血清饥饿.