五苓散治疗非酒精性脂肪性肝病的网络药理学研究和实验验证

摘要

[目的]探讨五苓散治疗非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制.[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)对五苓散中有效成分进行筛选及靶点预测,检索GeneCards、 在线人类孟德尔遗传(online mendelian inheritance in man,OMIM)数据库筛选NAFLD疾病靶点,利用韦恩图在线平台筛选五苓散-NAFLD核心靶点,使用Cytoscape 3.7.1建立化合物-疾病-靶点调控网络,基于DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析.建立NAFLD大鼠模型,五苓散干预28d后检测大鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、p53蛋白、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)表达水平,行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色以观察肝组织病理学变化.[结果]基于TCMSP得到五苓散的27个有效成分和62个潜在靶点,经筛选获得与NAFLD疾病发生、发展相关的靶点1732个,构建韦恩图得到五苓散治疗NAFLD的核心靶点27个,GO功能富集分析主要包括脂质反应、乙醇脱氢酶活性等功能途径;KEGG通路富集分析主要包括TNF信号通路、p53信号通路、IL-17信号通路等通路途径.动物实验结果显示,五苓散可显著降低NAFLD模型大鼠血清TC、TG、LDL-C水平,亦可显著降低肝组织TNF-α、p53、IL-17表达水平,同时肝组织病理变化显著改善.[结论]五苓散治疗NAFLD具有多成分、多靶点、多通路整体调节的作用特点,经实验证实五苓散能够改善NAFLD模型大鼠血清TC、TG、LDL-C水平,其作用可能与调控肝组织TNF-α、p53、IL-17表达有关.