N-乙酰半胱氨酸对哮喘模型小鼠nTreg/Th17失衡影响的研究

摘要

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对哮喘模型小鼠自然调节性T细胞(natural regulatory T cells,nTreg)/辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)(nTreg/Th17)失衡的影响,并探讨其起效机制.方法 50只6周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、NAC低剂量组、NAC中剂量组、NAC高剂量组5个组,每组10只.模型组、NAC低剂量组、NAC中剂量组、NAC高剂量组采用卵清蛋白致敏及激发制备哮喘小鼠模型,并制备T细胞悬液.NAC低剂量组、NAC中剂量组、NAC高剂量组小鼠分别按照50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg体重给予NAC灌胃(浓度50μg/ml),每天1次,7 d为1个疗程,治疗1个疗程.疗程结束后,RT-PCR法检测叉状头螺旋转录因子3(fork-head helix transcription factor 3,FOXP3)mRNA、维A酸相关孤独受体(retinoid-ralated orphan receptorγt,RORγt)mRNA表达水平;ELISA法检测白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)水平;苏木精-伊红染色法观察肺组织病理形态变化.结果 和对照组比较,模型组IL-17、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均升高而IL-10水平降低,FOXP3 mRNA相对表达量下降而RORγt mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);和模型组比较,NAC中剂量组、NAC高剂量组IL-17、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均降低而IL-10水平升高,FOXP3 mRNA相对表达量升高而RORγt mRNA相对表达量下降,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 NAC促进FOXP3基因表达,减少RORγt基因表达,抑制Th17的分化,纠正nTreg/Th17失衡是NAC在哮喘治疗中缓解炎症的作用环节之一.