MDV型疫苗株pp38基因同源物在家蚕细胞中的表达

摘要

用 PCR技术 ,从马立克氏病病毒 CVI988/C株感染的鸡胚成纤维细胞基因组 DNA中扩增出含起始密码子的 pp38基因同源物编码序列 .在 Southern blotting中 ,pp38基因探针能识别该 PCR扩增片段 .将该扩增片段克隆进 p UC1 8质粒载体 ,并进行了全序列分析 .进一步将该基因克隆入转移载体 p BacPAK8中 ,得到重组转移载体质粒 ,经酶切分析和 Southern blotting确证了插入方向的正确性 .以重组转移载体与经 Cvn 酶切线性化的亲本病毒 DNA通过脂质体法共转染家蚕细胞 ,通过白斑结合点杂交 ,筛选出纯化的重组病毒 .用间接荧光抗体试验检查重组病毒感染的家蚕细胞 ,可见感染细胞的胞浆及胞膜出现强荧光反应 .