游离型HPV16细胞类型特异性增强子片段的变异对启动子活性的影响

摘要

目的 研究宫颈癌中游离型HPV16中细胞特异性增强子（cell-type specific enhancer,CTSE）片段的变异对启动子P97活性的影响,探讨CTSE片段变异与游离型HPV16致癌机制的关系.方法 分别构建含HPV16突变型及野生型CTSE片段的重组报道基因载体（pCAT3-Promoter）表达系统,利用脂质体将重组的报道基因载体转染HeLa细胞;ELISA法测定细胞中CAT蛋白表达量的变化,了解变异CTSE片段对启动子活性的影响.结果 与无增强子的CAT报道质粒pCAT3-Promoter相比,插入HPV16 CTSE序列的pCAT3-Promoter重组报道质粒CAT蛋白表达量增加1.5 ～2.5倍;插入突变型CTSE序列的报道载体与插入野生型CTSE序列的报道载体相比,报道基因CAT蛋白表达量增加了约1.6倍.结论 陕西地区宫颈癌组织中HPV16 YY1位点突变的CTSE序列可激活启动子活性,YY1位点的突变与游离型HPV16 DNA致宫颈癌有密切关系.