miR-3942-3p负调控靶基因BARD1增加子宫内膜癌放射敏感性的研究

摘要

目的探讨微小RNA-132-3p(microRNA-132-3p,miR-3942-3p)对子宫内膜癌细胞放射敏感性的影响及其可能的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测子宫内膜癌细胞(HEC-1A细胞)和人子宫内膜上皮细胞(HEEC细胞)中miR-3942-3p和BRCA1关联环域1(BRCA1 associated RING domain 1,BARD1)的表达量。X射线(0、2、4、6 Gy)照射HEC-1A细胞后,RT-qPCR检测miR-3942-3p和BARD1的表达量。下调miR-3942-3p表达且经6 Gy X射线照射后,分别利用CCK-8、流式细胞仪和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测HEC-1A细胞增殖能力、细胞凋亡率、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2-相关X蛋白(BCL2-Associated X,Bax)表达量。Targetscan和双荧光素报告基因实验分析miR-3942-3p与BARD1之间的关系。下调BARD1表达且经6 Gy X射线照射后,分析HEC-1A细胞增殖能力、细胞凋亡率以及Bax、Bcl-2表达量。检测miR-3942-3p通过BARD1对HEC-1A细胞放射敏感性的影响。结果和癌旁正常组织相比,子宫内膜癌组织中miR-3942-3p的表达量明显降低(P<0.05),BARD1表达量明显升高(P<0.05)。和HEEC细胞相比,HEC-1A细胞中miR-3942-3p的表达量明显降低(P<0.01),BARD1表达量明显升高(P<0.01)。miR-3942-3p表达量随着X射线放射剂量增加而上升,BARD1表达量随着X射线放射剂量增加而降低。HEC-1A细胞经6 Gy X射线照射后,下调miR-3942-3p降低了HEC-1A细胞的放射敏感性。miR-3942-3p靶向BARD1。下调BARD1后经6 Gy X射线照射显著提高HEC-1A细胞增殖能力,降低细胞凋亡率,上调miR-3942-3p通过BARD1增强了HEC-1A细胞的放射敏感性。结论上调miR-3942-3p负调控靶基因BARD1增强子宫内膜癌细胞的放射敏感性。