荷载hTERT基因double-shRNA溶瘤腺病毒对裸鼠人前列腺癌细胞移植瘤的抑制作用

摘要

目的 探讨荷载人类端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因2个不同位点的shRNA的溶瘤腺病毒ZD55-double-hTERT对裸鼠人前列腺癌DU145细胞移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人前列腺癌DU145细胞移植瘤模型,瘤体内分别注射ZD55-double-hTERT、ZD55-hTERT1(荷载hTERT基因单个位点的shRNA的溶瘤腺病毒)、ZD55-hTERT2(荷载hTERT基因单个不同位点的shRNA的溶瘤腺病毒)和磷酸缓冲盐溶液(PBS),定期测量肿瘤体积,激光共聚焦和Western blot法检测移植瘤hTERT蛋白表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡.结果 7周后各组肿瘤平均体积为:PBS组(1841.5±182.3)mm3,ZD55-hTERT1组(689.0±93.5)mm3,ZD55-hTERT2组(669.2±84.3)mm3,而ZD55-double-hTERT组仅为(237.5±26.2)mm3.ZD55-double-hTERT组与ZD55-hTERT1组、ZD55-hTERT2组之间差异显著(P<0.01).ZD55-double-hTERT对hTERT基因的沉默效果明显提高,hTERT蛋白检测荧光强弱依次为:ZD55-double-hTERT组