Apelin-13对HT-22细胞凝血酶损伤后自噬机制的调节

摘要

目的 探讨Apelin-13对于小鼠海马神经元HT-22细胞凝血酶损伤后自噬的调节机制,研究PTEN/Akt/FoxO3a信号通路是否参与调控HT-22细胞凝血酶损伤后自噬.方法 将牛血浆来源的凝血酶加入离体培养的HT-22细胞中构建细胞损伤模型,将细胞随机分为对照组(C组)、凝血酶处理组(T组)、凝血酶联合Apelin-13处理组(T+A组),培养9h后进行相关检测.倒置显微镜观察细胞形态,CYTO-ID自噬染色试剂盒检测细胞中自噬泡数目,蛋白免疫印迹实验检测自噬相关蛋白-微管相关蛋白LC3的表达及信号通路相关蛋白PTEN、Akt、p-Akt、FoxO3a的表达,并通过免疫荧光观察FoxO3a的表达.结果 与T组相比,加入Apelin-13后HT-22细胞体积增大,突起增多;自噬体染色荧光强度下降,PTEN表达上调,Akt磷酸化水平下降,FoxO3a蛋白表达增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低;细胞内FoxO3a荧光强度增加.结论 Apelin-13通过PTEN/Akt/FoxO3a信号通路抑制凝血酶损伤后的HT-22细胞自噬,这可能是Apelin-13对于HT-22细胞凝血酶损伤后细胞保护机制之一.