自噬在皮质酮致HT-22细胞损伤中的作用

摘要

cqvip:主要探讨自噬在皮质酮(CORT)诱导小鼠海马神经元HT-22细胞损伤中的作用。以不同浓度CORT(0,50,100,200μmol·L^-1)处理HT-22细胞24 h或200μmol·L^-1 CORT处理HT-22细胞不同时间(0,4,8,12,24,48 h)后,镜下观察细胞形态,MTS法检测细胞活力,Western blot检测自噬标志物LC3及p62蛋白表达;同时进一步考察自噬诱导剂Rapamycin和自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)对CORT神经毒性的影响。结果发现CORT可呈剂量和时间依赖性地降低HT-22细胞活力并诱导细胞发生明显的形态学变化。与对照组相比,随着CORT浓度的增加,自噬体形成标志蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值显著升高,自噬底物蛋白p62的表达并无明显变化。然而,200μmol·L^-1 CORT作用于HT-22细胞不同时间后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高,在48 h时最为显著(P<0.01),同时p62的表达呈现先增加后逐步减少趋势。此外,与CORT组比,诱导自噬加重了CORT对HT-22细胞的损伤,而抑制自噬则减轻了CORT的细胞毒性。研究表明皮质酮增加了HT-22细胞的自噬水平,自噬介导了皮质酮诱导的HT-22细胞损伤,抑制自噬可以减轻皮质酮的神经毒性。