加贝酯对脑缺血再灌注大鼠脑组织病理学改变的影响

摘要

目的 研究加贝酯(GM)对脑缺血再灌注(IR)大鼠脑组织病理学改变的影响及其机制.方法 将240只成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、IR组、尼莫地平(NMP)组和5、10、20 mg·kg-1·d-1 GM组,每组40只.除假手术组外,其余各组大鼠采用线栓法制备脑IR模型;假手术组大鼠除不在颈外动脉切口和插入线栓外,其余操作同模型组.造模完成后,5、10、20 mg·kg-1·d-1 GM组大鼠分别经尾静脉注射5、10、20 g·L-1的GM溶液,NMP组大鼠经尾静脉注射2 g·L-1的NMP溶液,假手术组和IR组大鼠经尾静脉注射生理盐水,各组注射剂量均为1 mL·kg-1,每日1次,连续7 d.末次给药2 h后,采用Zausinger评分法评估各组大鼠神经功能,伊文思蓝渗透法测定各组大鼠血脑屏障(BBB)通透性,干湿比重法测定各组大鼠脑组织含水量,苏木精伊红染色法、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法观察各组大鼠脑组织病理学变化和细胞凋亡情况;透射电子显微镜观察各组大鼠神经细胞超微结构变化;生物化学分析法测定各组大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blot法检测各组大鼠脑组织中核因子-κB(NF-κB)蛋白相对表达量.结果 假手术组大鼠脑组织形态结构及神经细胞超微结构均正常;IR组大鼠脑组织可见神经细胞数量减少、间隙增大、排列无序,胞体皱缩呈空泡状变性、细胞核固缩深染,细胞膜破裂、细胞质溶解,核仁边界不清,线粒体肿胀、嵴断裂溶解,粗面内质网扩张、颗粒脱落等;与IR组比较,各干预组大鼠脑组织形态结构病变、细胞损伤及神经细胞超微结构病变均明显改善.与假手术组比较,IR组大鼠神经功能缺损评分降低,BBB通透性和脑组织含水量升高,神经细胞凋亡指数升高,脑组织中SOD、GSH-Px活性降低,MDA水平升高,NF-κB蛋白相对表达量上调(P<0.05).与IR组比较,5、10、20 mg·kg-1·d-1 GM组大鼠神经功能评分升高,BBB通透性和脑组织含水量下降,神经细胞凋亡指数降低,脑组织中SOD、GSH-Px活性升高,MDA水平降低,NF-κB蛋白相对表达量下调,且均呈剂量依赖性趋势.20 mg·kg-1·d-1 GM组大鼠除脑组织含水量外以上各指标的变化均优于NMP组.结论 GM对脑IR大鼠脑组织病理学改变、神经细胞超微结构病变具有抑制作用,对BBB通透性具有保护作用,其机制可能与降低氧化应激、下调NF-κB蛋白表达以及抑制细胞凋亡有关;较高剂量GM(20 mg·kg-1·d-1)对脑IR大鼠脑组织的保护作用优于NMP.