复合T辅助细胞表位基因质粒的构建及测序

摘要

目的制备复合T辅助细胞表位基因.方法复合T辅助细胞表位由5个T辅助细胞表位组成(结核杆菌热休克蛋白65 p1-20、风疹蛋白E2-4p54-65、人工合成T辅助细胞表位PADRE、沙眼衣原体热休克蛋白60 p35-48、破伤风类毒素p830-843),其基因序列由219个核苷酸组成.人工合成4条69bp的DAN片段,各片段首尾之间有19bp的互补序列, 应用DNA互补延伸拼接技术将4条DNA片段拼接成复合T辅助细胞表位,通过克隆、测序进行筛选.结果通过人工合成基因片段,应用DNA互补延伸拼接技术,成功制备了 219个碱基的复合T辅助细胞表位基因,构建了复合T辅助细胞表位基因质粒.结论复合T辅助细胞表位基因的成功制备为研究复合T辅助细胞表位高效疫苗奠定了基础.