糖化牛血清白蛋白及其抗体的制备

摘要

目的 制备特异性强、效价高的抗晚期糖化终末产物(AGEs)的多克隆抗体,以用于AGEs免疫化学方法的检测.方法 用牛血清白蛋白与葡萄糖在体外共同孵育,制备糖化牛血清白蛋白(AGEs-BSA),经凝胶层析纯化后,免疫新西兰家兔,获取抗AGEs-BSA抗血清,经硫酸铵盐沉淀法制备多克隆抗体.结果 荧光光谱和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定结果表明,成功制备出AGEs-BSA.ELISA结果证实,制备出特异性强、效价高的抗AGEs的多克隆抗体,其效价高达12 000.结论 应用高糖孵育BSA可以制备出AGEs-BSA,通过AGEs-BSA免疫新西兰家兔成功制备特异性强、效价高的抗AGEs的多克隆抗体,可以用于AGEs免疫化学方法的检测,并为进一步研究AGEs在阿尔茨海默病发病中的作用奠定基础.