大鼠颅脑损伤后Caspase-9的表达变化及其法医学意义

摘要

目的 探讨大鼠颅脑损伤后Caspase-9随时间变化的规律及其法医学意义.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假损伤组以及损伤后1、6、12 h及1、2、3、5、7、10 d和14 d共12组.采用免疫组织化学SP方法、ELISA和图像分析技术观测大鼠脑外伤后不同时间段平均光密度值、阳性面积比及血清中Caspase-9含量,并对所测数据进行统计学分析.结果 ELISA检测结果,正常对照组血清Caspase-9含量为(8.75±2.37)ng/mL,伤后12 h组血清中Caspase-9含量明显高于对正常对照组,至伤后1 d组血清中Caspase-9含量达到高峰,为(45.23±3.31)ng/mL,此后血清中Caspase-9含量逐渐下降,至伤后7 d组血清含量降至正常范围.Caspase-9免疫组织化学染色结果,脑损伤后1～6 h,损伤区周围及海马可见个别Caspase-9细胞,着色较浅,损伤后12 h,出现较多的Caspase-9阳性产物,损伤至1 d 时阳性细胞进一步增多,达到高峰,染色明显加深,伤后2～5 d有很明显的Caspase-9阳性细胞,染色较深,伤后7～14 d,阳性细胞明显减少.同比之下,假损伤组阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比均高于正常组,但差异无统计学意义(P>0.05),而在损伤1～12 h之间,损伤组阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比逐渐升高,在1 d 时达到高峰,分别为(0.424±0.017)OD和(19.31±1.96)%,且与正常对照组及假损伤组相比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),之后随着时间的延长,阳性反应物的平均光密度值及阳性面积比逐渐下降.结论 大鼠脑外伤后Caspase-9的表达呈现出升高-高峰期-逐渐下降期的规律性变化,可能为法医学损伤时间推断和颅脑损伤鉴定提供一种新的指标.