ELISA检测

摘要： 为检验市场上鸽新城疫抗体ELISA检测试剂盒的准确性及可靠性,从新疆喀什地区规模化鸽养殖场及鸽养殖合作社采集192份肉鸽血样,同时用血凝及血凝抑制试验以及某品牌鸽新城疫抗体ELISA检测试剂盒进行抗体检测,并以前者的检测结果作为"金标准",对ELISA检测试剂盒的性能进行评价.结果显示:ELISA试剂盒的敏感性为12.3％,特异性为97.4％,阳性似然比为4.73,阴性似然比为0.90,符合率为29.1％,约登指数为0.097,ROC曲线下面积为0.635.结果表明,该ELISA试剂盒检测鸽新城疫抗体的能力较差.这提示养殖企业及实验室选择ELISA方法检测鸽新城疫抗体前,应先对试剂有效性进行科学评估.

摘要： 本试验目的是对伪狂犬病毒gB抗体ELISA检测的不确定度进行评估,确保检测结果的准确性及可靠性。采用的方法是按照《兽医检测实验室ELISA试验测量不确定度评估指南CNAS-GL043-2020》来分析试验的不确定来源并评定各分量的标准不确定度、合成标准不确定度和扩展不确定度。评估结果显示,标准不确定度为0.055,扩展不确定度为0.11,置信水平P=95%,k=2。试验表明,检测不确定度的主要来源为加样器加样测量和阴性对照测量均值。在样品测量值处于阳性判定值附近时,需要注意不确定度的存在。

摘要： 兽医实验室中血清抗体的检测主要采用ELISA检测方法,本文结合兽医实验室的实际操作总结对日常ELISA检测中常出现的问题进行探讨,发现ELISA检测中常见问题的影响因素包括样品的处理、实验操作方法、实验仪器设备等。提示在兽医实验室检测中必须严格掌握ELISA操作方法,减少或避免因操作失误而导致的实验失败,本文可为兽医实验室同行提供帮助。

摘要： 目的探讨核酸检测(NAT)联合ELISA检测技术在献血者血液筛查中的应用价值。方法选择2021年1月至2021年10月在本地区采集的19845份无偿献血标本,对所有标本均使用两种不同ELISA试剂进行检测,对至少一种试剂结果为阴性的标本进行NAT检测,分别使用浩源检测系统或诺华检测系统进行检测,分析NAT检测结果。结果19845份无偿献血标本经NAT检测,一级反应池共检测了4205个,其中出现85个反应性一级反应池,反应率为2.02%(85/4205);拆分后进行单检或再鉴别检测,共有44份标本出现反应性,总反应率为0.22%(44/19845)。诺华操作系统共检测1970份标本,出现8个反应性,反应率为0.41%(8/1970);然后再进行鉴别检测,共4份标本出现反应性,反应率为0.20%(4/1970)。浩源操作系统共检测17875份标本,出现77个反应性一级混样池,反应率为0.43%(77/17875);拆分后进行单检,共40份标本出现反应性,反应率为0.22%(40/17875);两种操作系统反应率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论献血者血液筛查中ELISA检测联合NAT检测可起到补充作用,提高输血安全。

摘要： 从新疆乌鲁木齐县、吉木萨尔县主产县采集共92份马铃薯样本,使用植物检测病毒抗血清进行ELI?SA检测,摸清当前乌鲁木齐周边地区马铃薯病毒的种类和染毒率,全面掌握马铃薯病毒的发生情况,以期为有效防治病毒病提供重要科学依据.

摘要： 牛结核病是由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起的一种慢性消耗性人畜共患病.该病可通过排泄物及分泌物等进行传播,严重威胁畜牧业的发展及城乡居民的身体健康.为保障牛奶、牛肉等畜产品市场安全和人民生命健康安全,牛结核病的防控意义不言而喻.本文以PPD变态反应为检测标准,对ELISA检测结果进行评价,论述了ELISA方法在牛结核病检测中的使用可行性,以期为临床生产中牛结核病的检测提供数据支持.

摘要： 目的 比较血清酶联免疫吸附法(ELISA)与支气管肺泡灌洗液(BALF)荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测儿童大叶性肺炎合并肺炎支原体(MP)的效果.方法 回顾性分析2017年1月-2019年12月于笔者医院进行支气管肺泡灌洗的80例大叶肺炎合并MP感染患儿的临床资料.患儿在入院后1～6d通过ELISA法实施肺炎支原体特异性抗体(MP-IgM)检测,并以BALF荧光定量PCR检测肺炎支原体DNA(MP-DNA).观察并对比患儿检测结果的阳性率,以及不同病程与年龄患儿经血清ELISA与BALF荧光定量PCR检测的结果.结果 该组患儿BALF荧光定量PCR检测的阳性率91.25％(73/80)高于血清ELISA检测的48.75％(39/80),差异有统计学意义(P＜0.01).血清ELISA检测病程≤7d的阳性率低于＞7d的阳性率(P＜0.01),而 BALF荧光定量PCR检测病程≤7 d与＞7d的阳性率对比,差异无统计学意义(P＞0.05).血清ELISA检测年龄≤8岁的阳性率低于＞8岁的阳性率(P＜0.01),而BALF荧光定量PCR检测年龄≤8岁与＞8岁的阳性率对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 相较于血清ELISA,BALF荧光定量PCR检测儿童大叶性肺炎合并MP的效果更为理想.

摘要： 旨在对重庆武隆区某鸡场种用鸡群进行禽白血病检测,并开展病原净化工作.分别采集鸡场种用鸡群的泄殖腔试子、鸡蛋和精液样本,利用ELISA检测技术对禽白血病感染性抗原进行检测,对比分析不同样本对检测结果的影响以及禽白血病在不同品种中的检出率,评价种用鸡群的禽白血病感染情况,并制定合理的病原净化措施.检测结果表明,该鸡场种用鸡群中存在禽白血病,总检出率为18.9％,其中,母鸡阳性率为16.88％,公鸡阳性率为30.07％.建议对该鸡场扩大检测规模,重点对种用鸡群不同世代进行禽白血病监测,及时淘汰阳性感染病例.

摘要： 研究旨在原核表达气肿疽梭菌细胞毒素A(CctA)基因,用纯化的重组蛋白建立其间接ELISA检测方法,并验证气肿疽梭菌疫苗的免疫效果.利用大肠杆菌密码子的偏爱性优化CctA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a(+),双酶切鉴定原核表达质粒pET28a-CctA并测序.将重组质粒转入大肠杆菌,经IPTG诱导得到高表达的重组CctA包涵体蛋白.包涵体蛋白变性后经镍(Ni)柱纯化,SDS-PAGE检测其纯化效果.以豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清为一抗,用Western blotting方法检测重组CctA蛋白的反应原性.用棋盘滴定法建立间接ELISA检测方法,以复性后的重组CctA蛋白作为检测抗原,摸索抗原包被浓度、封闭液的种类及浓度、抗体的最适稀释度和反应条件等.选用3批气肿疽灭活疫苗免疫豚鼠后采集血清,同时用攻毒和间接ELISA两种方法验证疫苗的免疫效力.质粒双酶切结果显示,得到大小约853 bp的条带,与预期相符,且测序结果正确.SDS-PAGE结果表明,成功表达并纯化大小为35 ku的重组CctA蛋白.Western blotting结果显示,豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清与重组CctA蛋白具有良好的反应原性.建立的间接ELISA法的最适条件为:抗原的包被浓度为0.5 μg/mL,于4°C包被过夜;封闭液选择10％胎牛血清,37°C孵育2 h;二抗的稀释度为1:8 000;室温避光显色10 min后终止反应,测定D450nm值.当P/N＞4.6时,间接ELISA法检测结果与豚鼠攻毒试验结果拟合度较好.本研究成功表达CctA基因并纯化了重组CctA蛋白,建立的以重组CctA蛋白为检测抗原的间接ELISA检测方法,有望成为气肿疽灭活疫苗免疫效果验证的替代方法.

摘要： 目的 分析核酸扩增技术与ELISA(酶联免疫吸附剂测定)检测在献血者血液筛查中的效果.方法 选取2019年3月～2020年5月我血站献血者血液样本138370份为研究对象,分别采用核酸扩增技术与ELISA检测,对比两种不同检测技术结果.结果 ELISA检测中,HBsAg(乙型肝炎表面抗原)阳性663份,抗-HCV阳性235份,抗-HIV阳性181份;核酸检测检测结果HBS-DNA阳性63份,HCV-RNA阳性14份,HIV-RNA阳性7份;核酸扩增检测联合ELISA检测的阳性率高于ELISA检测(P<0.05).结论 采用核酸扩增技术、ELISA检测可有效降低漏检几率,最大程度保证输血安全.

摘要： 目的：建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用. 方法：采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度.同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测. 结果：所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致. 结论：所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测.

摘要： 目的：建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用. 方法：采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度.同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测. 结果：所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致. 结论：所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测.

摘要： 目的：建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用. 方法：采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度.同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测. 结果：所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致. 结论：所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测.

摘要： 目的：建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用. 方法：采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度.同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测. 结果：所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致. 结论：所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测.

摘要： 目的：建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用. 方法：采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度.同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测. 结果：所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致. 结论：所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测.

摘要： 研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1∶400稀释,以3％牛血清白蛋白作为封闭液.该方法的检测限为5×105pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒.特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应.该方法还具有较好的稳定性.

摘要： 研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1∶400稀释,以3％牛血清白蛋白作为封闭液.该方法的检测限为5×105pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒.特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应.该方法还具有较好的稳定性.

摘要： 研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1∶400稀释,以3％牛血清白蛋白作为封闭液.该方法的检测限为5×105pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒.特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应.该方法还具有较好的稳定性.

摘要： 研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是:羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1∶400稀释,以3％牛血清白蛋白作为封闭液.该方法的检测限为5×105pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒.特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应.该方法还具有较好的稳定性.

摘要： 为研究小反刍兽疫病毒(PPRV)竞争ELISA试剂盒的生产工艺,本试验利用昆虫细胞表达的PPRV核蛋白及其单克隆抗体,建立一种特异性高、敏感性强的PPRV竞争ELISA检测方法,并对该方法的各个步骤进行优化,确定该方法的最适条件,从而确定竞争ELISA的操作程序.并用该方法与OIE推荐的PPRV rC-ELISA抗体检测试剂盒同时检测来自西藏、内蒙古共977份临床羊、牛血清样本,结果显示特异性、敏感性、符合率分别达99.89％、93.82％、99.38％.本研究建立的PPRV竞争ELISA方法为该病毒检测试剂盒的研制奠定技术基础,为小反刍兽疫的防控提供科学依据.

摘要： 本发明属于免疫学和生物技术领域，为了解决目前针对胰蛋白酶类似物TrypLE没有较好的检测方法，提供了胰蛋白酶类似物TrypLE双抗夹心ELISA检测试剂盒及检测方法与应用。通过构建一种酶联免疫吸附的方法，可以有效，快速，便捷的检测样品中TrypLE的含量。包括：包被有捕获抗体的酶标板制成的固相抗体、酶标抗体、TrypLE标准品、样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。用于定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中胰蛋白酶的专用试剂盒。本试剂盒操作方便简单，可直接用于样品分析，重现性好，稳定性高。

摘要： 本发明提供了杂交瘤细胞、洋葱黄矮病毒抗体及其应用、ELISA检测试剂盒和ELISA检测方法，涉及生物技术领域。本发明提供的杂交瘤细胞分泌单抗4G12、单抗6D7、单抗6E10或单抗10C8，能够用于上述单抗的制备。经发明人研究发现，上述单抗均能够特异性的与洋葱黄矮病毒结合，能够用于构建洋葱黄矮病毒的检测方法。本发明提供的洋葱黄矮病毒的ELISA检测方法，包括采用本发明提供的葱黄矮病毒抗体包被酶标板，然后依次进行待测样本孵育、抗体标记的辣根过氧化酶孵育和显色。该方法检测灵敏度高，特异性强，检测准确性好，方便快捷，为葱属植物病害检测、检疫、脱毒提供关键技术支持。

摘要： 本发明涉及微流控芯片ELISA检测技术领域，特别涉及ELISA检测微流控芯片和ELISA检测微流控芯片体系以及它们的应用。芯片包括：进样单元(1)、储液单元(2)、反应单元(3)及废液单元(4)；该微流控芯片还包括用于对待检样本定量的第一定量单元(5)，第一定量单元包括第一狭缝(51)、以及由第一狭缝隔开的第一样本腔室(52)和第二样本腔室(53)；第一样本腔室与所述进样单元相通，第二样本腔室与所述废液单元相通。芯片体系由上中下三层组成；中层为所述芯片；上下层用于覆盖封闭中层；上层有与进样单元连接的进样孔，及对应储液单元的让位孔。所述芯片检测过程简单，可对反应样本进行定量，灵敏度高、重复性强。

摘要： 本发明涉及用于ELISA检测黄曲霉毒素的标准品通用替代物、其制备方法及黄曲霉毒素ELISA检测方法。用于ELISA检测黄曲霉毒素的标准品通用替代物，其特征在于：它为可识别各鼠源抗黄曲霉毒素单克隆抗体的兔抗鼠抗体。它是以鼠源抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体、抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和抗黄曲霉毒素G1单克隆抗体作为混合抗原，经免疫新西兰长耳大白兔，颈动脉取血，血清亲和纯化后获得。该标准品通用替代物无毒无害，可分别通过替代黄曲霉毒素

摘要： 本发明公开了检测植物感染番茄黄化曲叶病毒的dot-ELISA和组织印迹ELISA方法及其试剂盒及应用。利用针对番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白制备的单克隆抗体，建立配比最优化的斑点酶联免疫吸附法（dotenzyme-linkedimmunosorbentassay，dot-ELISA）及组织印记ELISA的方法，并研发快速检测试剂盒。该发明适用于番茄、辣椒、茄子、烟草、龙葵、曼陀罗等茄科植物。利用该发明可对田间蔬菜样品番茄黄化曲叶病毒感染情况进行调查，检测病毒病的发病率，评估番茄黄化曲叶病毒在田间的发生分布情况及流行爆发趋势。该检测方法灵敏度高、特异性好、耗时短、成本低，为番茄黄化曲叶病毒的快速、大规模检测提供技术支撑。

摘要： 抗原捕获IgA酶联免疫吸附测定(antigen capture IgA Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ACA－ELISA)已被开发用于检测抗黄病毒IgA。该测定使用由单克隆抗体捕获的黄病毒裂解物抗原，优选登革病毒裂解物抗原。优选使用缀合有报告基团(例如辣根过氧化物酶(HRP))的兔抗IgA来检测测试血清中的所捕获抗黄病毒IgA。发现该测定比抗人IgA捕获ELISA(AAC－ELISA)灵敏至少8倍。发现基于血清或唾液的ACA－ELISA与“黄金标准”抗登革热IgM检测技术相比更加灵敏和快速，并且可用作感染早期确诊登革热的诊断工具。

摘要： 本发明属于免疫学和生物技术领域，为了解决目前针对胰蛋白酶类似物TrypLE没有较好的检测方法，提供了胰蛋白酶类似物TrypLE双抗夹心ELISA检测试剂盒及检测方法与应用。通过构建一种酶联免疫吸附的方法，可以有效，快速，便捷的检测样品中TrypLE的含量。包括：包被有捕获抗体的酶标板制成的固相抗体、酶标抗体、TrypLE标准品、样品稀释液、包被缓冲液、封闭液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。用于定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中胰蛋白酶的专用试剂盒。本试剂盒操作方便简单，可直接用于样品分析，重现性好，稳定性高。

摘要： 本发明提供一种针对非洲猪瘟的抗体检测方法，该检测方法以非洲猪瘟病毒采集猪的口腔拭子、鼻腔拭子、肛门拭子、阴道拭子或乳汁为检测样品，通过ELISA抗体检测方法获得检测样品中IgA的含量，从而对检测猪的感染及免疫情况作出判断，或进一步结合检测猪的抗原检测结果对感染情况作出判断。本发明的方法采样简单、敏感性好、特异性强、且能彻底消除由于采血引起交叉感染的风险。

摘要： 本发明公开了一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒及检测方法，检测试剂盒包括肺炎衣原体重组抗原ELISA包被酶标条、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、TMB显色液和终止液。终止液为2 M浓硫酸。CP重组抗原的序列为SEQ ID NO.1。通过方阵优化最佳抗原包被浓度和血清稀释度、确定酶标二抗稀释度、确定封闭液种类和封闭时间、抗体孵育时间。本发明用于检测CP抗体具有特异性强、敏感性高、稳定性好和通量高等优点，可以很好的而检测人体血清中CP抗体，对临床诊断具有一定的指导意义。

摘要： 本实用新型涉及微流控芯片ELISA检测技术领域，特别涉及ELISA检测微流控芯片和ELISA检测微流控芯片体系。芯片包括：进样单元(1)、储液单元(2)、反应单元(3)及废液单元(4)；该微流控芯片还包括用于对待检样本定量的第一定量单元(5)，第一定量单元包括第一狭缝(51)、以及由第一狭缝隔开的第一样本腔室(52)和第二样本腔室(53)；第一样本腔室与所述进样单元相通，第二样本腔室与所述废液单元相通。芯片体系由上中下三层组成；中层为所述芯片；上下层用于覆盖封闭中层；上层有与进样单元连接的进样孔，及对应储液单元的让位孔。所述芯片检测过程简单，可对反应样本进行定量，灵敏度高、重复性强。