安石榴苷对小鼠巨噬细胞生长因子及M1/M2型极化的影响

摘要

目的 探讨安石榴苷(punicalagin,PUN)对小鼠巨噬细胞中生长因子及M1/M2极化的影响.方法 将RAW264.7细胞或小鼠原代腹腔巨噬细胞随机分为正常对照组、LPS(脂多糖,10μg/mL)组、PUN(50μmol/L)组、LPS+PUN组.药物作用4、12 h后,采用qRT-PCR检测细胞中生长因子(VEGF、PDGFa、PDGFb等)mRNA的变化,以及M1/M2型相关炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、M1/M2标志物诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)mRNA表达的动态变化,采用Western blot法检测蛋白表达变化,采用ELISA检测细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10的含量.结果 在LPS刺激的RAW264.7细胞中,与对照组比较,PUN(50μmol/L)对上述生长因子并无正性调控作用,差异无统计学意义(P>0.05).LPS刺激后,与对照组比较,M1巨噬细胞标志物iNOS、IL-6、IL-1β、TNF-α等的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明模型建立成功.与LPS组比较,PUN干预组在RAW264.7细胞或小鼠原代腹腔巨噬细胞中,M1型巨噬细胞标志物iNOS、IL-6等的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05),而M2型巨噬细胞标志物Arg-1和IL-10的表达水平上升,差异有统计学意义(P<0.05),Arg-1的蛋白表达量无统计学差异(P>0.05).结论 PUN对于炎性巨噬细胞中部分生长因子并无正性调控作用,但可促进巨噬细胞从M1型向M2型转化.