鸟类陈旧标本DNA提取方法的研究

摘要

应用3种DNA提取方法（蛋白酶K法，Chelex 100法，硅颗粒法），从馆藏湿地鸟类陈旧标本的羽毛、皮肤、骨骼组织中提取基因组DNA，经PCK扩增后对线粒体12SrDNA部分片段进行测序和Genbank查对，以探讨鸟类陈旧标本DNA的最佳提取方法和提取组织．结果表明，利用鸟类陈旧标本能够提取到基因组DNA．蛋白酶K法和硅颗粒法能够从白鹭（Egretta garzetta）标本的骨骼组织中提取到DNA并获得长度425bp的线粒体12SrDNA序列（Genbank接收号AY766387），蛋白酶K法还能够从白鹳（Ciconiadconia）标本的羽毛中获得长度263bp的线粒体12SrDNA序列（Genbank接收号AY766388），Chelex 100法不能从鸟类标本中提取到DNA．蛋白酶K法的DNA提取量较大，但是步骤繁琐而导致DNA被污染的几率增大，因此，实验过程中要注意防止污染，且提取骨组织DNA要经过纯化．硅颗粒法的步骤简单，污染几率降低，提取骨骼组织DNA不需经过纯化，但是其DNA提取量较少，不能用于羽毛DNA的提取．因此，硅颗粒法是从鸟类陈旧标本骨骼组织提取DNA的理想方法，蛋白酶K法可用于鸟类陈旧标本羽毛的DNA提取．