天牛基因组DNA提取方法和标本保存方式的比较研究

摘要

[目的]为天牛的分子系统学研究奠定基础.[方法]采用不同提取方法(饱和NaCl法、CTAB法、SDS-蛋白酶K消化法)从不同保存条件下天牛标本中提取基因组DNA,进行RAPD扩增,比较不同保存条件和不同DNA提取方法对DNA提取质量的影响,探索天牛标本的最佳保存方式和最佳DNA提取方法.[结果]不同方法提取的DNA质量有明显差异.CTAB法和SDS-蛋白酶K消化法提取的DNA质量较好,条带清晰完整,无降解和RNA污染.但饱和NaCl法的提取效果较差.天牛标本的最佳保存条件为在-80℃条件下无水乙醇浸泡.CTAB法提取的天牛基因组DNA能扩增出稳定清晰的多态性片段.[结论]CTAB法提取的天牛DNA质量最好,可直接用于PCR扩增.