融合基因Aβ-HBcAg的原核表达及表达蛋白的免疫反应性和免疫原性分析

摘要

目的研究β-淀粉样肽(β-amyloid peptide, Aβ)与乙型肝炎核心抗原(HBcAg)融合基因Aβ-HBcAg的原核表达,检测融合蛋白的免疫反应性及免疫原性.方法将重组质粒pBV220/Aβ-HBcAg转化大肠杆菌DH5α,温控表达,超声破碎细菌,通过SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色和ELISA等方法,观察Aβ-HBcAg的表达及融合蛋白的免疫反应性;用融合蛋白免疫Balb/c小鼠,ELISA法检测血清中的抗-Aβ抗体和抗-HBc抗体滴度.结果融合蛋白以包涵体的形式存在于沉淀中,表达量为菌体沉淀的5%,融合蛋白既有Aβ的免疫反应性,又有HBcAg的免疫反应性.Balb/c小鼠经过3次免疫后,血清中的抗体滴度很低,继续强化免疫2次后,血清中抗-Aβ抗体滴度、抗-HBc抗体滴度分别上升为1∶800和1∶3 200.结论融合基因Aβ-HBcAg 可在大肠杆菌DH5α中表达, 表达蛋白有一定的免疫反应性和免疫原性,但表达量较低,免疫反应性和免疫原性较弱.提示融合基因Aβ-HBcAg的表达量和融合蛋白免疫原性的提高尚需进一步研究.