牛樟芝1个AcHMGS基因的克隆与表达分析

摘要

为了探明牛樟芝三萜化合物合成途径中的关键限速酶羟甲基戊二酰辅酶A合成酶的调控机制,为其三萜生物合成酶表达机制的研究提供参考,从牛樟芝中分离并克隆出1个基因,将其命名为AcHMGS,利用生物信息学分析软件了解其结构特性,分析该基因在不同碳氮源添加物培养基上的表达情况.结果表明,AcHMGS基因含有完整的开放阅读框,全长为1440bp,编码574个氨基酸;含有6个外显子、5个内含子.由蛋白质活性保守位点分析可知,AcHMGS蛋白包含由21个氨基酸组成的活性中心"GNTDIEGVDSKNACYGSTASL"和5个参与底物催化的保守氨基酸,其中2个能影响酶的活性.分子系统进化分析显示,AcHMGS蛋白与根纤维孔菌蛋白具有较高的同源性.AcHMGS基因的表达量在不同碳氮源添加物的培养基上差异显著,以甘露醇为碳源添加物、牛肉浸粉为氮源添加物的诱导表达量最高.