MNNG诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤修复模型的建立

摘要

目的 本实验研究了诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤的适宜MNNG浓度以及损伤后DNA修复的时间范围。方法 用终浓度为5、10、50、100、500、1000μmol／L的亚硝基胍（N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine，MNNG）分别处理小鼠胸腺细胞0．5h，然后用RPMI-1640培养基培养，分别于0h、0．5h、2h、4h、8h检测细胞存活情况和细胞DNA损伤修复情况。结果 随着MNNG浓度的增大，细胞死亡率、DNA拖尾率以及彗星尾长都显著升高，其中100、500、1000μmol／L MNNG处理细胞后，细胞数量少，拖尾非常严重，无法测量。不同MNNG浓度之间的DNA损伤和修复程度差异显著（P〈0．01），呈现明显的剂量反应关系。DNA拖尾率在0．5h或2h达到高峰，彗星尾长在2h最大，在2-8h内，拖尾率和彗星尾长都显著降低（P〈0．01），接近对照。结论 采用5μmol／L或10μmol／L MNNG处理小鼠胸腺细胞0．5h可以诱导细胞DNA损伤，损伤后的DNA可以在2～8h内基本修复。