β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒的构建及表达

摘要

目的构建β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒,为进一步研究-βcaten in在神经细胞内与其它蛋白质如tau、PS1的相互作用以及在阿尔茨海默病发病机制中的作用提供一种有用的工具。方法用亚克隆的方法将β-连环素基因插入到真核表达载体pEGFP-C1,重组质粒pEGFP-cat瞬时转染野生型鼠成神经瘤细胞株,并在荧光倒置显微镜下观察转染效率。结果酶切鉴定和测序结果证实编码-βcaten in的重组质粒构建成功,免疫荧光技术和免疫印记结果显示-βcaten in-GFP融合蛋白在真核细胞中获得表达。结论成功构建β-连环素融合绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在鼠成神经瘤细胞中表达了-βcaten in-GFP融合蛋白。