大鼠周龄及切片厚度对脊髓片培养神经细胞活性的影响

摘要

目的探讨离体培养脊髓片的理想厚度和大鼠的最佳周龄.方法通过不同周龄的大鼠(1周、2周、3周、4周龄各10只,共40只),以及不同厚度(切片厚度分为:100 μm、200 μm、300 μm以及400 μm4种)的脊髓组织切片培养,采用MTr技术进行脊髓片培养细胞的活性鉴定,观察脊髓片培养不同时间点其神经细胞的活性.结果1～7 d鼠龄的脊髓组织片培养1～14 d时细胞活性最高,但其神经细胞结构形态容易受到破坏,不利于观察,且在培养超过14 d时神经细胞活性明显下降;2～3周鼠龄的脊髓组织片培养细胞,在培养14 d后仍有较高的神经细胞的活性并保持较好的细胞形态结构;1～4各周龄组大鼠200 μm和300 μm左右厚度的脊髓片培养神经细胞活性最稳定(85%～95%).结论进行离体脊髓片培养,选择7～14 d(即1～2周龄)大鼠作为取材对象较为理想,选择200 μm～300μm切片厚度的脊髓片进行培养较为合适.