水苏碱对阿尔茨海默病体外模型Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响

摘要

目的 探讨水苏碱对阿尔茨海默病体外模型Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制.方法 根据GSE85871数据分析水苏碱的差异基因,并使用STITCH数据库鉴定水苏碱的靶基因.用Aβ25-35处理的PC12细胞建立阿尔茨海默氏病体外模型,水苏碱处理PC12细胞后,MTT法测定细胞活力,通过流式细胞术检测细胞周期,并使用qRT-PCR和Western blot检测相关的基因或蛋白质的表达.结果 GSE85871数据显示,水苏碱的差异基因中有37个上调基因和48个下调基因.STITCH数据库的结果显示,RPS8和EED是水苏碱的靶基因.PC12细胞用Aβ25-35处理后,细胞的活力与对照组比较明显下降(61.06±3.32 vs 93.11±5.37,P<0.05),RPS8(0.52±0.11)和EED(0.47±0.12)基因表达水平与对照组比较明显下降下降(P<0.05),同时RPS8(0.62±0.14)和EED(0.60±0.13)蛋白表达水平与对照组(0.93±0.06)比较明显下降(P<0.05),抑制凋亡相关蛋白Bcl-2(0.36±0.02)和p53(0.35±0.03)表达降低(P<0.05).水苏碱治疗可以改善Aβ25-35的作用,阻断G2/M期细胞周期,RPS8和EED基因表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2和p53的蛋白表达升高(P<0.05).结论 水苏碱在抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡中起重要作用,其机制可能与调节RPS8和EED从而促进Bcl-2和p53表达并抑制细胞的凋亡有关.