蜂毒肽类似物的基因表达与构效关系

摘要

采用先前建立的蜂毒肽构效关系(QSAR)模型,预测设计了6条蜂毒肽类似物基因.采用Pichia pastoris表达系统,构建pPICZa-A-Mel重组质粒,电击转化酵母.以a-因子为分泌信号,在GS115中进行分泌表达.经筛选、诱导培养后,6×His亲和层析纯化表达产物,并经Tricine-SDS-PACE电泳证实.新设计的6条类似物基因表达后的抑茵活性与重组天然蜂毒肽相比,4条增强,2条减弱.类似物[C]的抑菌效价是重组天然蜂毒肽的1.62倍左右,活性最强.类似物[B]的表达量最高,其抑菌活性仅次于[C].6种类似物的溶血活性均降低至重组天然蜂毒肽的1/15以下.对蜂毒肽分子结构的优化设计合理,达到了保留或提高抑菌活性、降低溶血活性的目的.