一株绿色木霉产外切β-葡聚糖苷酶条件及其纯化与性质的研究

摘要

从树林中腐烂木块上采集并筛选出一株分泌外切β-葡聚糖苷酶(exo-1,4-β-D-glucanase or cellobiohydrolase,CBH)的绿色木霉菌株. 在100 mL的锥形瓶中装入40 mL培养基的产酶状况最好,其通气量最佳,培养液初始pH为8时绿色木霉产生的CBH活力最高. 随绿色木霉生长时间的延长,CBH的活力与培养基中的葡萄糖含量呈交替的一高一低的波浪状变化. 通过硫酸铵分部分离、葡聚糖G-100凝胶过滤、DEAE -纤维素52阴离子交换柱层析等方法使绿色木霉所产的CBH达到了电泳纯,纯化倍数为16.3. CBH的反应最适温度为60 ℃,最适pH为6.0, Km(底物为羧甲基纤维素钠)为17.34 mg/mL.