hPin1原核表达、纯化及热稳定性研究

摘要

利用E.coli BL21原核表达,纯化得到了His-hPin1融合蛋白,并研究了它的热稳定性.在中性条件下进行不同温度处理,SDS-PAGE分析表明,低于40℃处理不会影响HishPin1的溶解性,50～100℃处理会使其部分变性而沉淀.荧光发射光谱研究表明,未处理的His-hPin1具有339 nm的荧光发射峰;热处理使荧光发射峰的位置变化,低于40℃处理对Hs-hPin1的荧光强度影响较小,50～100℃热处理使His-hPin1的荧光强度明显降低.圆二色谱研究表明,热处理对His-hPin1的二级结构有影响,引起α-螺旋含量的明显减少,而无规卷曲增加.以上数据表明hPin1是一个相对热稳定的蛋白.