bcl-2／bcl-xl和bcl-2反义寡核苷酸对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的比较长循环脂质体介导的bcl-2/bcl-xl反义寡核苷酸(ASON)和bcl-2 ASON对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法①分别将包裹bcl-2 ASON的阴离子长循环脂质体(NA-S)和阳离子长循环脂质体(PA-S),包裹bcl-2/bcl-xl ASON的阴离子长循环脂质体(NA-D)和阳离子长循环脂质体(PA-D),包裹错配序列的阴离子长循环脂质体(NS)和无义序列的阴离子长循环脂质体(NN),游离bcl-2 ASON(FB1)和bcl-2/bcl-xl ASON(FB2),以及pH7.4、0.01mol/LHEPES(对照组,CON)与MCF-7细胞孵育。②孵育24h后,HE染色观察MCF-7细胞凋亡,流式细胞术检测细胞中bcl-2癌蛋白的表达,MTT比色法检测细胞存活率。结果bcl-2/bcl-xl ASON处理组(包括NA-D、PA-D、FB2)MCF-7细胞胞核固缩,染色质凝集呈斑块状或边缘成月牙状,凋亡小体形成。NA-S、PA-S、FB1、NS和NN组细胞凋亡不明显。NA-D与NA-S组、PA-S与PA-D组、FB1与FB2组bcl-2癌蛋白的荧光强度分别为1.92±0.08与2.83±0.16(P=0.028)、4.20±0.18与2.85±0.57(P=0.001)、5.70±1.16与4.35±0.11(P=0.001)。孵育24h后,NA-D与NA-S组、PA-S与PA-D组、FB1与FB2组细胞存活率分别为(0.32±0.03)%与(0.58±0.07)%(P=0.014)、(0.71±0.03)%与(0.45±0.04)%(P=0.014)、(0.88±0.04)%与(0.57±0.05)%(P=0.003)。结论抑制bcl-2和bcl-xl基因比单纯抑制bcl-2基因更能诱导肿瘤细胞凋亡。