靶向Bcl-xl mRNA低自由能区域的反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞系MCF-7体外增殖和凋亡的影响

摘要

目的；观察结合于Bcl-xlmRNA上低自由能区域的反义寡核苷酸对Bcl-xl基因的抑制效应，以及对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖和凋亡的影响 方法；基于最小自由能算法分析出Bcl-xlmRNA上的低结合自由能区域，并针对这一区域合成反义核酸As587；转染高表达Bcl-xl的人乳腺癌细胞系MCF-7；倒置显微镜及透射电子显微镜下观察细胞形态学改变；MTT法测定细胞增殖抑制率，RT-PCR检测Bcl-xlmRNA水平；免疫细胞化学方法检测Bcl-xl蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期及凋亡发生率。 结果；1.MCF-7细胞增殖受抑，且抑制效应与寡核苷酸浓度、作用时间呈量效及时效关系 2.Bcl-xlmRNA及蛋白表达水平下降，细胞出现凋亡 结论；1.As587能抑制Bcl-xl基因的表达，在体外能抑制乳腺癌细胞增殖 2.对于较短的mRNA，利用最小自由能原理对其设计反义核酸是一种可以信赖的方法，以此方法设计的反义核酸As587在体外对Bcl-xl基因表现出了较为高效的抑制作用

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权的声明

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

附录