番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆的构建

摘要

为研究番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的基因功能及相关致病机理,构建了2种TYLCV的侵染性克隆.将两端含有间隔序列(intergenic sequence,IR)的TYLCV全基因组片段分别克隆到质粒pUC57和pCAMBIA2300上得到侵染性隆pTYLCV1.X和pCB2300-1.X.利用质粒pTYLCV1.X直接注射法与pCB2300-1.X的农杆菌浸润法分别接种番茄植株.结果显示:侵染性克隆pTYLCV1.X在注射番茄6周后出现系统症状,侵染效率为23.1％-42.1％;农杆菌浸润法接种的植株4周后观察到明显的病害症状,侵染效率为87.5％-100％.PCR检测结果证明2种侵染性克隆均可在番茄体内产生完整的病毒基因组DNA,实时定量PCR测定病毒浓度可达102个/番茄细胞.以上结果表明,含有2个IR的TYLCV基因组载体具有侵染活性.