二甲双胍联合奥沙利铂对结肠癌SW480细胞凋亡及细胞周期的影响

摘要

目的 探讨二甲双胍(metformin,Met)联合奥沙利铂(oxaliplatin,Oxa)对结肠癌SW480细胞凋亡及细胞周期的影响.方法 用MTT法检测分别应用二甲双胍(0,5,10,20,40 mmol/L)、奥沙利铂(0,5,10,20,40μmol/L)对SW480细胞的增殖抑制作用.PI单染法检测分别应用二甲双胍(0,5,10,20,40 mmol/L)、奥沙利铂(0,5,10,20,40μmol/L)及二甲双胍(10 mmol/L)联合奥沙利铂(10μmol/L)对SW480细胞凋亡的影响.流式细胞术检测二甲双胍(10 mmol/L)、奥沙利铂(10μmol/L)及两者联合作用时SW480细胞周期的变化.Western blot法检测二甲双胍(10 mmol/L)、奥沙利铂(10μmol/L)及两者联合作用SW480细胞凋亡及细胞周期相关蛋白的表达.结果 单独应用二甲双胍、奥沙利铂作用于SW480细胞后细胞的增殖随浓度增加而降低,二甲双胍联合奥沙利铂与单药作用相比细胞增殖抑制作用明显(P<0.05).二甲双胍、奥沙利铂分别处理SW480细胞,细胞凋亡率随着给药浓度的增高而增加,联合用药组与单药组相比,细胞凋亡率明显增加(P<0.05).细胞周期检测显示与空白组及单药组相比,联合用药组SW480细胞在G0/G1期比例增加(P<0.05).Western blot结果显示与空白组和单药组相比,联合用药组作用于SW480细胞后Cyclin D1及CDK4的表达降低,P21的表达增加(P<0.05).促凋亡蛋白cleaved-caspase-3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 二甲双胍联合奥沙利铂可抑制结肠癌SW480细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与细胞周期的阻滞有关.